Los autores de este artículo utilizaron la tecnología de diagnóstico CRISPR para desarrollar una prueba de diagnóstico rápida y sin amplificación para el SARS-CoV-2 que puede detectar ARN viral directamente de un hisopo nasal. Usando la proteína Cas13a, que puede unirse directamente al ARN monocatenario (ssRNA), los investigadores desarrollaron un complejo CRISPR-Cas13 para apuntar al ssRNA. La adición de una sonda extintor de fluoróforo a las cadenas de ssRNA permitió la cuantificación de la actividad de escisión de Cas13a, donde la escisión de la sonda separa el extintor del fluoróforo y permite que se produzca la fluorescencia. El complejo CRISPR-Cas13a puede detectar directamente ARN viral con una sensibilidad de ~ 100 copias / ul en menos de 30 minutos, eliminando así el paso de preamplificación que a menudo se requiere para las pruebas de diagnóstico basadas en ácidos nucleicos. La tasa experimental de escisión de Cas13a de ssRNA se comparó y confirmó con la cinética de la enzima de Michaelis-Menten. Este modelado también permitió cálculos retrospectivos para determinar la concentración de ARN objetivo a partir de la concentración estimada de Cas13a activado. La sensibilidad del ensayo mejoró al combinar ARN CRISPR (ARNcr) para formar varios complejos diferentes que podrían apuntar a diferentes regiones de ARN viral. Finalmente, los resultados podrían cuantificarse con un microscopio de fluorescencia basado en un teléfono móvil, aumentando la accesibilidad de esta tecnología a las regiones que carecen de equipos de laboratorio robustos para realizar pruebas de diagnóstico.